| 品牌 | 其他品牌 | 貨號 | BFN60804024 |
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| 規(guī)格 | T25培養(yǎng)瓶x1 1.5ml凍存管x2 | 供貨周期 | 現貨 |
| 主要用途 | 僅供科研 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè) |
細胞名稱 | 人皮膚成纖維細胞BJ |
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貨物編碼 | BFN60804024 | ||
產品規(guī)格 | T25培養(yǎng)瓶x1 | 1.5ml凍存管x2 | |
細胞數量 | 1x10^6 | 1x10^6 | |
保存溫度 | 37℃ | -198℃ | |
運輸方式 | 常溫保溫運輸 | 干冰運輸 | |
安全等級 | 1 | ||
用途限制 | 僅供科研 2類 | ||
培養(yǎng)體系 | DMEM高糖培養(yǎng)基（Hyclone）+10%胎牛血清（Gibco）+1%雙抗（Hyclone） | ||
培養(yǎng)溫度 | 37℃ | 二氧化碳濃度 | 5% |
簡介 | 人皮膚成纖維細胞BJ取自女性皮膚組織，成纖維樣，貼壁培養(yǎng)。該細胞引種自ATCC CRL-2522 | ||
注釋 | 倍增時間43h | ||
STR信息 | Amelogenin X,Y CSF1PO 10,12 D5S818 12 D7S820 11,12 D13S317 8,9 D16S539 9,13 TH01 7,8 TPOX 10,11 vWA 16,18 | ||
參考文獻 | Twist1抑制人皮膚成纖維細胞的復制性衰老 王淑華 南昌大學 2019-05-01
穿膜肽TAT修飾載丹酚酸B脂質體的制備及其抑制人皮膚成纖維細胞增殖與遷移初步研究 吳艷婷;郭思旖;時軍;陳桂添;許小琪 中草藥 2019-01-12
PubMed=23325432; DOI=10.1101/gr.147942.112 Varley K.E., Gertz J., Bowling K.M., Parker S.L., Reddy T.E., Pauli-Behn F., Cross M.K., Williams B.A., Stamatoyannopoulos J.A., Crawford G.E., Absher D.M., Wold B.J., Myers R.M. Dynamic DNA methylation across diverse human cell lines and tissues. Genome Res. 23:555-567(2013) Yi X, et al. Both transcriptional and posttranscriptional mechanisms regulate human telomerase template RNA levels. Mol. Cell. Biol. 19(6): 3989-3997, 1999. PubMed: 10330139
Bodnar AG, et al. Extension of life-span by introduction of telomerase into normal human cells. Science 279: 349-352, 1998. PubMed: 9454332
Huffman KE, et al. Telomere shortening is proportional to the size of the G-rich telomeric 3'-overhang. J. Biol. Chem. 275: 19719-19722, 2000. PubMed: 10787419
Morales CP, et al. Absence of cancer-associated changes in human fibroblasts immortalized with telomerase. Nat. Genet. 21: 115-118, 1999. PubMed: 9916803 | ||
驗收細胞注意事項
1、收到人皮膚成纖維細胞BJ ，請查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快聯系。
2、收到人皮膚成纖維細胞BJ，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題，細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況，出現此狀態(tài)時，請不要打開細胞培養(yǎng)瓶，應立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止 3-5 小時左右，讓細胞先穩(wěn)定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。
3、收到人皮膚成纖維細胞BJ后，請鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進口胎牛血清。剛接到細胞，若細胞不多時 血清濃度可以加到 15％去培養(yǎng)。若細胞迏到 80%左右 ，血清濃度還是在 10％。
4、收到人皮膚成纖維細胞BJ時如無異常情況 ，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出，留下 5-10ML 培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)：超過 80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液，1000 轉/分鐘離心 3 分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
5、將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以備不時之需。
6、24 小時后，人皮膚成纖維細胞BJ態(tài)已恢復并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加 3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般 1-3 分鐘，不超過 5 分鐘。可以放入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入 3-5ml 培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數量決定分瓶數，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。
7、貼壁細胞 ，懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時，換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液，37℃，5%CO2 培養(yǎng)。
特別提醒： 原瓶中培養(yǎng)基不宜繼續(xù)使用，請更換新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)。
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