產(chǎn)品概況

檢測(cè)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（Enzyme Linked-Immuno-Sorbent Assay, ELISA）。往預(yù)先包被人銜接蛋白酶活化因子1(APAF1)抗體的包被酶標(biāo)板孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人銜接蛋白酶活化因子1(APAF1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。

試劑盒組成

注:使用前請(qǐng)檢查試劑盒中試劑的標(biāo)簽和數(shù)量與表格是否一致

試劑盒性能

1. 樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為95以上。
2. 批內(nèi)變異系數(shù)與批間變異系數(shù)應(yīng)小于10%。

需自備的試劑盒器材

1. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2. 37℃恒溫箱
3. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測(cè)樣品較多時(shí)，最好用多通道移液器
4. 去離子水，用來(lái)稀釋洗滌緩沖液

結(jié)果計(jì)算

繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：在 Excel 工作表中，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線，按曲線方程計(jì)算各樣本濃度。或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。

注意事項(xiàng)

1. 試劑盒保存在 2 – 8 ℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶，屬于正常現(xiàn)象，可水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。初次使用試劑盒時(shí)，應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘，以便試劑集中到管底。
2. 要嚴(yán)格避免操作過(guò)程中酶標(biāo)板干燥，干燥會(huì)使酶標(biāo)板上生物成份迅速失活。
3. 禁止混用不同批次試劑盒內(nèi)的試劑。
4. 本公司提供的96孔酶標(biāo)板是單條可拆型酶標(biāo)板，用戶可按需求使用;剩余的酶標(biāo)板請(qǐng)放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。
5. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，最好做復(fù)孔。