目前常用的感受態細胞制備方法有CaCl2和RbCl（KCl）法，RbCl（KCl）法制備的感受態細胞轉化效率較高，但CaCl2 法簡便易行，且其轉化效率*可以滿足一般實驗的要求，制備出的感受態細胞暫時不用時，可加入占總體積15％的無菌甘油于-70℃保存（半年），因此 CaCl2法為使用更廣泛。
感受態細胞的操作方法：
1、DH5α感受態細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質粒或連接產物）并用手bo打EP管底輕輕混勻，冰中靜置25分鐘。
2、42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3、向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基（2YT或LB），混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4、5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5、將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養至少15小時。
注意事項：
1、感受態的細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2、混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3、轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。
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